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Resumen:
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En este trabajo se desarrollaron metodologías sostenibles en el contexto de la química analítica, que fueron aplicadas a la determinación de beta-carbolinas en muestras de suero, y de antitumorales derivados de la luotonina A en sueros y cultivos celulares, así como a su caracterización espectrofluorimétrica y al estudio de su actividad biológica in-vitro. Se redujo el consumo de disolvente orgánico en un 37% usando ciclodextrinas en las fases móviles para separar heterociclos derivados de beta-carbolina en columnas C-18. Las columnas C-1 permitieron ahorrar un 70% del componente orgánico, minimizando la generación de residuos. Se desarrolló, optimizó y validó un nuevo método cromatográfico para la cuantificación de luotonina A y varios análogos en muestras de suero. Se comparó la selectividad de tres fases estacionarias fenil-hexil-, pentafluorofenil-propil- y octadecil-silano (PH, PFP y C-18, respectivamente). Sólo la C-18 consiguió resolver todos los compuestos. Se comparó el comportamiento de estas tres fases estacionarias en columnas empaquetadas con partículas de sílice totalmente porosas y con partículas core-shell. Las columnas core-shell mejoraron la eficacia y el tiempo de análisis (más de un 50%) manteniendo las presiones de trabajo. Se optimizó la separación en la columna core-shell C-18 y se aplicó un gradiente logrando la separación de la camptotecina, la luotonina A y sus 6 derivados. La metodología se validó y aplicó a la determinación de los antitumorales en líneas celulares. Se estudió por primera vez la luminiscencia de la luotonina A y sus derivados, diseñando un método sostenible y miniaturizado en formato multi-pocillo para estudiar el aumento de la solubilidad de los derivados de luotonina A tras formar complejos de inclusión con ciclodextrinas. Finalmente, se evaluó la potencia antitumoral de los derivados estudiados mediante ensayos enzimáticos de inhibición de topoisomerasa 1 y el efecto citotóxico ejercido sobre líneas celulares tumorales de colon, cérvix y pulmón
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